Руководство по методам лабораторного тестирования новой коронавирусной пневмонии

Руководство по методам лабораторного тестирования новой коронавирусной пневмонии
На февраль 21, Национальная комиссия здравоохранения опубликовала новый план профилактики и контроля коронавирусной пневмонии (пятое издание), и в качестве приложения, выпустили новые технические инструкции по лабораторному тестированию пневмонии на коронавирусную инфекцию (пятое издание).

Руководство по методам лабораторного тестирования новой коронавирусной пневмонии

Чтобы направлять отделы контроля заболеваний на всех уровнях и других соответствующих учреждениях для проведения лабораторных испытаний новой коронавирусной пневмонии, Это техническое руководство специально разработано.
1. Сбор и обработка образцов
1. Носоглоточные мазки: Сэмплер мягко поддерживает главу собранного человека, держит мазку в одной руке, Тамп прикреплен к ноздрю, и медленно углубляется назад вдоль нижней части нижнего носового канала. Жесткий, чтобы избежать кровотечения от травмы. Когда кончик тампона достигает задней стенки носоглотки полости, Аккуратно вращай его в течение одной недели (В случае рефлекторного кашля, это должно остаться на некоторое время), Затем медленно вынимайте тампон, и погрузить головку мазки в раствор сохранения, содержащий 2 к 3 мл вируса (Также доступно Использование изотонического солевого раствора, раствор для культивирования ткани или фосфатный буферный раствор), отбросить хвост, и затянуть кепку.
2. Мазок из глотки: Собранное лицо ужимает физиологическим физиологическим раствором сначала, Человек для отбора проб ставит тампон в стерильный солевой раствор, чтобы увлажнить его (запрещено помещать тампон в раствор сохранения вируса, чтобы избежать аллергии, вызванной антибиотиками), голова собранного человека слегка наклонилась, рот расширился, с “ах” звуки, обнажение глоточных миндалин с обеих сторон, Тамп на основе языка, и вытирать миндалины глотки с обеих сторон предмета, по крайней мере, немного жестко взад -вперед 3 раз, А по крайней мере 3 На задней стене глотки второй, погрузить головку мазки в трубку, содержащую 2 к 3 Ml раствора сохранения вируса (Изотонический солевой раствор, также можно использовать раствор для культивирования ткани или фосфатный буферный раствор), отбросить хвост, и затянуть кепку. Тампония глотки также можно помещать в ту же трубку, что и назоглоточный тампон. 3. Экстракт носоглотки или экстракт дыхательных путей: Используйте коллекционер, подключенный к насосу с отрицательным давлением для извлечения слизи из выделения носоглотки или дыхательных путей от трахеи. Вставьте голову коллекционера в носовую полость или трахею, Включить отрицательное давление, вращать головку коллекционера и медленно выходить, Соберите извлеченную слизь, и промыть коллекционеру один раз с помощью 3 мл отбора отбора жидкости (Вы также можете использовать педиатрический катетер для подключения к альтернативному коллекционеру Syzre 50 мл.).
4. Глубокая мокрота: Пациент обязан собирать мокроту в кашлере в пластиковой трубке 50 мл, содержащей 3 мл раствора образца после глубокого кашля. Если мокрота не собирается в растворе отбора проб, Добавить 2 ~ 3 мл раствора для отбора проб или добавить равный объем раствора для пищеварения мокроты перед тестом.
Мокрота для пищеварительной жидкости формула раствора:
Перед использованием, разбавить запасной раствор 100 мл с деионизированной водой. Фосфатный буфер, содержащий 1 G/L протеиназа K также может быть сжижена с равным объемом мокроты.
5. Жидкость бронхиального лаважа: Вставьте голову коллекционера в трахею (около 30 см глубины) от ноздри или сокета трахеи, вводить 5 мл физиологического раствора, Включить отрицательное давление, вращать головку коллекционера и медленно снимать. Соберите извлеченную слизь и промойте коллекционер один раз с помощью жидкости отбора проб (Вы также можете использовать педиатрический катетер для подключения к 50 -мл шприце, чтобы заменить коллекцию).
6. Альвеолярная лаважная жидкость: После местной анестезии, Вставьте оптоволокоптический бронхоскоп через рот или нос через глотку и вставьте его в ветвь правой средней доли или левый сегмент языка легкого, и вписать наконечник в отверстие бронхиальной ветки, и медленно добавляйте физиологию стерилизации через соленую воду биопсии трахеи, 30-50мл каждый раз, Общая сумма составляет 100-250 мл, не должно превышать 300 мл.
7. Фекальные образцы: Возьмите 1 мл раствора обработки образца, Возьмите размер образца сои и добавьте его в трубку, осторожно сосать это для 3-5 раз, пусть он стоит при комнатной температуре для 10 минут, центрифуга при 8000 об / мин для 5 минут, и сосать супернатант для обнаружения.
Раствор для обработки образца кала можно приготовить самостоятельно: 1.211 G Трис, 8.5 G натрий хлорид, 1.1 г безводной хлорид кальция или 1.47 G кальций хлорид, содержащий кристаллическую воду, растворяется в 800 Ml деионизированная вода, и приспосабливается к pH 7.5 с концентрированной соляной кислотой , Макияж до 1000 мл с деионизированной водой.
Суспензии стула также могут быть приготовлены путем растворения образцов стула с использованием раствора Хэнка или другого изотонического солевого раствора, раствор для культивирования ткани или фосфатный буфер. Если у пациента есть симптомы диареи, оставлять 3 к 5 мл образца стула, Аккуратно пипетка и смешивание, центрифуга в 8000 RPM для 5 минут, и нарисуйте супернатант для использования.
8. Анальный мазок: осторожно вставьте стерильный ватный тампон в задний проход 3 ~ 5 см., затем осторожно вращайся и вытащите его, Немедленно положите его в пробирку отбора отбора проб винта на 15 мл, содержащую 3 ~ 5 мл раствора сохранения вируса, отбросить хвост, и затяните крышку трубки.
9. Образцы крови: Рекомендуется использовать вакуумные кровеносные сосуды, содержащие антикоагулянт ЭДТА, для сбора 5 мл образцов крови. Определить экстракцию нуклеиновой кислоты с помощью цельной крови или плазмы в соответствии с типом выбранного реагента экстракции нуклеиновой кислоты. Разделить плазму, центрифуга целая кровь при 1500-2000 об / мин для 10 минуты и соберите супернатант в стерильной пластиковой трубке с винтом.
10. Образец сыворотки: Соберите 5 мл образца крови с вакуумной трубкой для сбора крови., оставить при комнатной температуре для 30 минут, центрифуга в 1500 ～ 2000 об / мин для 10 минут, Соберите сыворотку в стерильную пластиковую трубку.
Другие материалы: Соберите в соответствии с требованиями проектирования.
(5) Упаковка образцов
После коллекции, Он будет упакован в биологическую шкафу вторичной лаборатории биобезопасности.
1. Все образцы должны быть помещены в трубку сбора образцов подходящего размера с винтовой крышкой и прокладкой, которая устойчива к замораживанию, и затянулся. Номер образца, тип, Название и дата отбора проб указаны снаружи контейнера.
2. Поместите запечатанные образцы в запечатанную сумку, Каждая сумка ограничена одним образцом. Требования к упаковке образца должны соответствовать соответствующим стандартам в “Технические правила безопасного транспортировки опасных товаров по воздуху”.
3. Для транспортировки внешних образцов, Трехслойная упаковка должна проводиться в соответствии с типом образцов и инфекционных веществ класса A или B.
(6) Сохранение образцов
Образцы, используемые для выделения вирусов и тестирования нуклеиновых кислот, должны быть проверены как можно скорее. Образцы, которые могут быть обнаружены внутри 24 часы можно хранить при температуре 4°C; образцы, которые не могут быть обнаружены внутри 24 часы следует хранить при температуре -70°C или ниже. (если не- Хранится в 70 ℃, временно хранится в холодильнике при -20 ℃). Сыворотка может храниться при 4 ° С для 3 дней, и ниже -20 ° C для долгосрочного хранения. Специальные склады или счетчики должны быть настроены для сохранения образцов отдельно. Избегайте повторного замораживания и оттаивания во время транспортировки образцов.
(7) Образцы, представленные для проверки
Образцы должны быть отправлены в лабораторию как можно скорее после сбора. Если требуется перевозка на дальние расстояния, Рекомендуется использовать сухой лед и другие методы охлаждения для сохранения.

Отрицательные результаты испытаний на нуклеиновую кислоту не могут исключить новую инфекцию коронавируса. Факторы, которые могут вызвать ложные негативы, в том числе: Плохое качество выборки, такие как дыхательные образцы из ротоглотки, и т. д.; образцы, собранные слишком рано или слишком поздно; Недостаточный хранится и транспортируется и обрабатывает образцы; причины существования самой технологии, такие как вирусная мутация, Ингибирование ПЦР, и т.д.