Atualmente, a forma de prevenção e controle do novo coronavírus ainda é muito severa. Como a primeira etapa da detecção de ácido nucleico, a importância da coleta e preservação de amostras é indubitável. A indústria de inspeção costuma dizer “lixo em, lixo fora” é importante. O primeiro fator de influência é a coleta de amostras. Se houver um problema com a coleta da amostra, não importa quão bem o trabalho subsequente seja feito, o resultado será inválido. A escolha da solução correta de preservação de vírus e do tubo de coleta pode tornar a detecção da nova coroa mais eficaz
Quase todos os líquidos de preservação de vírus no mercado preservam diretamente os vírus vivos, causando equipe médica na amostragem, transporte e testes para enfrentar um risco maior de infecção. Em resposta a esta situação, a linha de frente do combate às epidemias precisa de amostras que possam inativar diretamente o vírus. Solução de preservação, mas deve-se notar que ao inativar o vírus, deve também considerar se a solução de preservação pode preservar de forma estável a integridade do ácido nucleico viral, de modo a evitar a degradação do ácido nucleico na amostra antes do teste, resultando em um “falso negativo” teste de ácido nucleico. Shenzhen Medico não contém solução de preservação do vírus do sal de guanidina para minimizar o risco de “falsos negativos”.
Comparamos os efeitos da solução de preservação contendo cloridrato de guanidina e isotiocianato de guanidina no mercado com a solução de preservação Shenzhen Medico sem sal de guanidina na preservação do coronavírus avícola a 37°C. Acontece que o ingrediente principal é a solução de preservação do sal de guanidina, e o efeito de preservação é muito insatisfatório.
As mesmas condições são 37°C. Após armazenamento por 1-7 dias, a eficiência de preservação do ácido nucleico viral é basicamente constante em 100% ao usar a solução de preservação Shenzhen Medico; enquanto a eficiência de preservação do ácido nucleico viral é gradualmente reduzida quando os outros dois componentes do sal de guanidina são usados. , Até o 7º dia, já era menos que 20%, indicando que o RNA está se degradando violentamente ao longo do tempo
Sal de guanidina (isotiocianato de guanidina ou cloridrato de guanidina, etc.), como um desnaturante de proteína clássico, é frequentemente usado para lise celular na extração de ácido nucleico, e também pode alcançar o efeito de inativar vírus, mas o componente sal de guanidina não tem a capacidade de operar em condições normais de temperatura. A capacidade de preservar o ácido nucleico viral é muito fácil de causar degradação da amostra, portanto, não é adequado para a preservação de novas amostras de coronavírus, portanto, é altamente recomendável que você escolha uma solução de preservação de vírus que não contenha sais de guanidina.
Aqui, apelamos à maioria dos trabalhadores médicos, se o propósito da sua amostragem for para teste de ácido nucleico e você não precisar cultivar vírus vivos, então você precisa prestar atenção aos seguintes aspectos ao escolher uma solução de preservação de vírus:
• Use uma solução de preservação que possa inativar o vírus
A detecção atual de ácido nucleico consiste em detectar o RNA viral na amostra, e o vírus precisa ser lisado. Portanto, desde que a integridade e a estabilidade do ácido nucleico viral possam ser garantidas, não há necessidade de preservar o vírus vivo. Portanto, na situação atual de combate à epidemia do novo coronavírus, é mais ideal inativar o vírus durante a coleta de amostras. Alguns fabricantes no mercado também introduziram soluções de armazenamento inativadas, mas os ingredientes inativados utilizados são sais de guanidina. Os resultados de experimentos comparativos descobriram que as soluções de armazenamento dos componentes do sal de guanidina não têm a capacidade de preservar os ácidos nucléicos virais em condições normais de temperatura., o que pode facilmente causar degradação da amostra. Não é adequado para a preservação de novas amostras de coronavírus. Portanto, recomendamos uma solução de preservação de vírus contendo desnaturantes de proteínas salinas sem guanidina, que pode inativar o vírus e garantir que o ácido nucleico viral não seja degradado quando armazenado à temperatura ambiente.
• O volume da solução de preservação no tubo de amostragem deve ser apropriado
É muito importante escolher uma solução de armazenamento com volume adequado: (1) Se cada amostra for amostrada separadamente, é recomendado que você escolha um tubo de amostragem de vírus com 1ml de solução de armazenamento. Não apenas o volume de amostragem pode atender às necessidades de extração e detecção de ácidos nucleicos a jusante, mas também comparado com solução de armazenamento de 3ml. A concentração do vírus aumentou em 3 vezes! ②Se uma triagem inicial em larga escala e um teste misto forem realizados, as amostras de swab de 3-5 pessoas são colocadas no mesmo tubo de amostragem. Recomenda-se que você use um tubo de amostragem de vírus com solução de preservação de 3ml para garantir que o volume da amostra possa atender às necessidades de extração de ácido nucleico a jusante, ao mesmo tempo que melhora a eficiência da detecção e reduz os custos de detecção.
• Use uma solução de preservação de vírus que possa transportar e preservar amostras em temperatura ambiente
Por causa da instabilidade do RNA, tubos tradicionais de amostragem de vírus precisam ser transportados para o laboratório dentro 48 horas a 4°C. Se a temperatura de transporte não estiver de acordo com o padrão, ácido nucleico viral pode ser degradado, resultando em “falso negativo” resultados do teste! Em contraste, se a Medico usar uma solução de armazenamento de vírus que possa transportar e armazenar de forma estável ácidos nucleicos virais à temperatura ambiente, o problema do transporte de amostras pode ser resolvido, melhorando assim a precisão dos resultados do teste.
• Use uma solução de preservação de vírus que possa proteger as amostras contra inativação em alta temperatura
As diretrizes relevantes da Comissão Nacional de Saúde exigem a inativação da amostra em alta temperatura antes da extração do ácido nucleico viral (tratamento acima de 56°C para 30 minutos), mas o Centro de Controle e Prevenção de Doenças de Pequim, O Centro de Pesquisa de Medicina Preventiva de Pequim e outras instituições publicaram artigos de pesquisa em Química Clínica. Isso mostra que a inativação em alta temperatura causará a degradação do ácido nucléico viral, reduzindo assim a taxa de detecção de ácido nucleico viral, que é uma das razões para a alta taxa de falsos negativos na detecção de ácido nucleico de novo coronavírus. Experimentos verificaram que, ao usar a solução de preservação de amostras do vírus Medico para armazenar amostras, a inativação em alta temperatura não tem efeito significativo na integridade do ácido nucleico do coronavírus.
As soluções de preservação de vírus desenvolvidas e produzidas por Shenzhen Médico são divididos em tipos inativados e não inativados. Diferentes soluções de preservação podem ser selecionadas de acordo com diferentes requisitos experimentais e condições de teste. Se você tiver alguma dúvida ou necessidade, por favor ligue para perguntar. Escolher a solução de preservação de vírus Shenzhen Medico é a escolha certa.
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